鉴别测定

【鉴别】 取本品 5mg ，用甲醇 2ml 溶解，滤过，滤液作为供试品溶液。另取牡荆素鼠李糖苷对照品，加甲醇制成每 1ml 含 1 mg 的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法（附录 Ⅵ B ）试验，吸取上述两种溶液 2 ～ 3 ? l ，分别点于同一硅胶 GF 254 薄层板上，以乙酸乙酯 - 甲醇 - 水 (25:5:3) 为展开剂，展开，取出，晾干，置紫外光灯 (254nm) 下检视。供试品色谱中，在与对照品色谱相应的位置上，显相同颜色的荧光斑点。

【 检查 】 干燥失重取本品 1g ，精密称定，置干燥至恒重的称量瓶中，在硫酸干燥器中干燥 24 小时，减失重量不得过 2.0% 。 【 特征图谱 】 照高效液相色谱法（附录 VI D ）测定。色谱条件与系统适用性试验同

【 含量测定 】 项下。积分参数 Slope Sensitivity:5,peak width:0.04 ，最小峰面积为 10 ，最小峰高为 S 峰峰高的 1% 。参照物溶液的制备取牡荆素鼠李糖苷对照品适量，精密称定，加 60% 乙醇制成每 ml 含 100 ? g 的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品 50mg ，精密称定，置 50ml 量瓶中，加 60% 乙醇溶解并定容至刻度，即得。测定法分别精密吸取参照物溶液与供试品溶液各 10 ? l ，注入液相色谱仪，测定，即得。供试品特征图谱中应有 4 个特征峰，与参照物峰相应的峰为 S 峰，计算各特征峰的相对保留时间比值，应符合以下规定：相对保留时间比值为 0.76 （峰 1 ） 1.00 （峰 S ）、 1.55（峰 3 ）、 1.94 （峰 4 ），其相对偏差不得过 5% 。 1 对照特征图谱峰 1 ：牡荆素葡萄糖苷，峰 S ：牡荆素鼠李糖苷，峰 3 ：牡荆素，峰 4 ：金丝桃苷 、

【 含量测定 】 总黄酮对照品溶液的制备精密称取无水芦丁对照品适量，加乙醇适量，超声处理使溶解，放冷，用乙醇稀释至刻度，摇匀，即得（每 1ml 含无水芦丁 0.20mg ）。标准曲线的制备精密量取对照品溶液 1ml, 2ml, 3ml, 4ml, 5ml, 6ml ，分别置 25ml 量瓶中，各加水至 6ml ，加 5% 亚硝酸钠溶液 1ml ，使混匀，放置 6 分钟，加 10% 硝酸铝溶液 1ml ，摇匀，放置 6 分钟，加氢氧化钠试液 10ml ，再加水至刻度，摇匀，放置 15 分钟，以相应的试剂为空白，照紫外 - 可见分光光度法（附录 Ⅴ A ），以 500nm 的波长处测定吸光度，以吸光度为纵坐标、浓度为横坐标，绘制标准曲线。测定法取本品 0.15g ，精密称定，置具塞锥形瓶中，精密加入稀乙醇 25ml ，密塞，摇匀，超声处理 5 分钟，放置 3 小时以上，滤过，精密量取续滤液 2ml ，置 25ml 量瓶中，用水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液。精密量取供试品溶液 2ml ，置 25ml 量瓶中，照标准曲线的制备项下的方法，自“加水至 6ml ”起，依法测定吸光度，同时精密量取供试品溶液 2ml ，置 25ml 量瓶中，加水至刻度，摇匀，作为空白溶液。从标准曲线上读出供试品溶液中芦丁的量，计算，即得。 1 S 3 4本品按干燥品计算，含总黄酮以无水芦丁（ C 27 H 30 O 16 ）计，不得少于 80.0% 。牡荆素鼠李糖苷照高效液相色谱法（附录 Ⅵ D ）测定。色谱条件与系统适用性试验以十八烷基硅烷键合硅胶为填充剂；以四氢呋喃 - 乙酸 - 水 - 甲醇 - 乙腈 (38:4:152:3:3) 为流动相；检测波长为 330nm 。理论板数按牡荆素鼠李糖苷峰计算应不低于 2500 。对照品溶液的制备取牡荆素鼠李糖苷对照品适量，精密称定，加 60% 乙醇制成每 ml 含 100 ? g 的溶液，即得。供试品溶液的制备取本品 50mg ，精密称定，置 50ml 量瓶中，加 60% 乙醇溶解并定容至刻度，即得。测定法分别精密吸取对照品溶液与供试品溶液各 10 ? l ，注入液相色谱仪，测定，即得。按干燥品计算，本品含牡荆素鼠李糖苷（ C 27 H 30 O 14 ）不得少于 8.8% 。

【 贮藏 】 密封，置阴凉干燥处。